図１　生体における活性酸素発生過程

各活性酸素分子種の性質はそれぞれ異なり「一重項酸素」および「ヒドロキシラジカル」は不安定なものの反応性が高く細胞内では酸化損傷の主要因である。一方、「スーパーオキシド」および「過酸化水素」は反応性は低いものの安定性は高いことから生体内では長時間留まり、金属イオンや紫外線刺激により「ヒドロキシラジカル」生成の原因となっている（表１）。生体での発生組織はさまざまで「一重項酸素」は主に光の関与する皮膚で、他の活性酸素種は呼吸や代謝、炎症過程で発生する。

本キットは検体の活性酸素分子種に対する特異的消去能を評価するために４種の活性酸素それぞれを評価することができる。

対象とする活性酸素を発生させる。検証するサンプルが存在時に活性酸素は消去される。その後、対象とする活性酸素特異的に検出する化学発光プローブと反応させることで短時間で高感度に活性酸素残量を測定することができる。

プロトコールはシンプルで４ステップ（一重項酸素測定キットは５ステップ）で測定できる。サンプルと活性酸素溶液（ROS solution）を反応後にそれぞれの活性酸素種特異的に反応する化学発光プローブ（Detection solutionを用いて残存する活性酸素を検出することで抗酸化能を評価する。

表3　果物・野菜・魚抽出物（水溶性成分）における抗酸化能評価

各キットを用いた果物・野菜・魚抽出物（水溶性物質）におけるGAEAC値およびTEAC値を表3に示す。

表２および表３に示すように同じ抗酸化物質や抽出物であっても活性酸素種によって消去能は異なる。

表４　果物・野菜・魚抽出物（水溶性成分）における抗酸化能評価

発光測定用のホワイトプレートでは試薬が無色透明の場合、添加ミスの可能性がある。本キットではミスを防ぐために試薬を着色しているために操作ミスを防ぐことができる。

本キットは従来の活性酸素測定法と比較してESR装置のような高価な機器を必要と発光測定機器で検証ができる。特筆すべき危険物質は使用していないため安全に試験することができる。さらに化学発光による測定のため検体の色や蛍光の影響を受けにくいのが特徴である（表４）。